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3分鐘了解下cck8細胞增殖檢測試劑盒的操作說明

更新時間:2023-01-14   點擊次數:791次
  cck8細胞增殖檢測試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應,如果待測物質有氧化性或還原性,可在加CCK-8之前更換新鮮培養基,去掉藥物的影響。若藥物影響比較小的情況可以不更換培養基,直接扣除培養基中加入藥物后的空白吸光度即可。
 
  cck8細胞增殖檢測試劑盒的操作說明:
 
  1、在96孔板中接種細胞懸液(100μL/孔),通常細胞增殖實驗每孔約2000個細胞,細胞毒性實驗每孔約5000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等因素決定)。
 
  2、按照實驗需要,進行培養并給予0-10μL特定的藥物刺激,并孵育一段時間(例如:6、12、24或48小時)。
 
  3、向每孔加入10μLCCK-8溶液。如果起始的培養體積為200μL,則需加入20μLCCK-8溶液,以此類推。
 
  4、在細胞培養箱內繼續孵育1-4小時,具體時間可以通過預實驗確定。
 
  5、用酶標儀測定在450nm處的吸光值,若無450nm濾光片,可以使用420-480nm的濾光片,但是450nm檢測靈敏度最高。如果樣品為高渾濁度的細胞懸液,可以使用大于600nm的波長,例如650nm,作為參考波長進行雙波長測定。
 
  6、如果需要暫時不測定O.D值,可以向每孔中加入10μL0.1MHCl溶液或者1%w/v的SDS溶液,避光保存在室溫,24小時內吸光度不會發生變化。